想要從生物樣本中提取出核酸，離不開核酸提取試劑的輔助，利用核酸提取試劑從生物樣本中提取核酸時，可能會遇到一些問題，影響到核酸提取的結果。那么核酸提取試劑使用常見問題有哪些呢？針對這個問題，慧慶小編為大家總結了一些內容，接下來就為大家帶來相關介紹。
  

  一、核酸提取試劑提取DNA常見問題

  

  1、提取的細菌基因組DNA有降解

  
  出現這種情況建議先確認選用的培養菌體是否新鮮，如果菌體需要進行儲存時，請將其保存在零下80℃的環境中。還有一種原因可能是起始菌液量過多，導致菌液裂解不充分，部分DNA降解。由于菌體本身富含DNA酶活性，建議先加入消解溶液然后再加入EDTA溶液來抑制內源性核酸酶，解決DNA降解問題。
  

  2、A260/280比值較低/高

  
  A260 值比較低可能是由于用水作為洗脫液，或是有蛋白質殘留。如果在操作過程中使用了苯酚，那么很有可能是由于苯酚殘留導致比值低。比值高的原因是由于有大量的RNA殘留，或者是沒有使用RNaseA，或RNaseA活性下降。
  

  3、提取的DNA活性差

  
  活性差是核酸提取試劑提取DNA的常見問題之一，原因有兩點，一個是提取的基因組DNA中鹽分濃度過高，這種情況建議操作時嚴格安裝說明書進行操作。另一個是由于提取的基因組DNA中含有乙醇，建議離心的速度和時間應該嚴格遵循說明書要求進行。

  二、核酸提取試劑提取RNA常見問題

  

  1、RNA得率低

  
  原因可能是由于該組織或是細胞中RNA的含量偏低。不同的生物細胞和組織中RNA的豐度是不同的，比如肝臟、心臟以及胰腺等是RNA高豐度的組織，而胚胎、腎臟、肺、腦、胸腺以及卵巢等屬于中豐度組織，低豐度的組織分別是脂肪、骨以及膀胱。
  
  其次樣本量過少或者過多也會導致RNA得率低。樣本量過少，細胞中RNA含量低，得率自然也低；樣本量過多則很有可能超過了裂解液的裂解能力范圍，導致裂解不完全，使得得率降低。
  

  2、RNA降解

  
  導致RNA講解的原因有三點，提取材料不新鮮、處理樣品的量太大以及RNase被污染。新鮮組織取得后應立即置于液氮中或立即放入RNAstore試劑中，以保證提取效果。
  

  3、RNA中有基因組DNA污染

  
  導致這種情況發生的原因有幾點，一個是樣本中的核酸含量過高，提取過程中沒有去除干凈，建議進行多次抽提。其次是RNA的沉淀條件不合適，使得DNA也被提取出來。還有就是溶液的 pH 值偏小，容易使 DNA 形成沉淀。
  
  以上就是慧慶小編針對核酸提取試劑使用常見問題有哪些問題帶來的相關介紹，希望能夠對大家有所幫助。如果您還有其他疑惑，歡迎隨時來電咨詢洛陽慧慶生物科技有限公司，我們會及時解答您的疑惑。